雙光束紫外可見分光光度計一般包括水相(溶液本身)、固相(懸浮物、底質)、生物相(水生生物)。在水質的常規(guī)監(jiān)測中,紫外可見分光光度法占有較大的比重。由于水和廢水的成分復雜多變,待測物的濃度和干擾物的濃度差別很大,在具體分析時必須選擇好分析方的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級躍遷而產生的吸收光譜。 由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構,其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎。
分光光度分析就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。它是帶狀光譜,反映了分子中某些基團的信息??梢杂脴藴使鈭D譜再結合其它手段進行定性分析。
雙光束紫外可見分光光度計對參比溶液和溶荊的選擇:
分光光度計的測量實際上是以通過參比池的光強度作為人射光強度來測定試樣的吸光度,先調節(jié)儀器使透過參比池溶液的吸光度為零,然后讓同一束光通過樣品,使得吸光度比較真實地反映待測物質的濃度,所以參比溶液的選擇非常重要。
如果僅有待測物質與顯色劑的反應產物有吸收,可用純溶劑或蒸餾水作參比溶液。如果顯色劑有顏色,并在測定波長下有吸收,則用顯色劑溶液作參比溶液,所加人顯色劑及其它試劑的量,與試樣中的加入量應一致。
如果樣品中其它組分本身的顏色對測定有干擾,而所用顯色劑沒顏色,則用不加顯色劑的樣品溶液作參比液。
正確選擇合適的溶劑,對提高分析的準確度起重要作用。為減小溶劑中雜質的影響,應選擇高純度的溶劑;溶劑應不與待測物質發(fā)生化學反應;待測物在溶劑中要有一定的溶解度;在測定的波長范圍內,溶劑本身沒有吸收,注意常用溶劑的最短可用波長;當用揮發(fā)性大的溶劑時,測量過程中吸收池應加蓋。