紫外分光光度計(jì)利用的是樣品對(duì)紫外光的吸收能力不同的原理,以測(cè)量某一特定波長(zhǎng)的紫外光波長(zhǎng)能量發(fā)生吸收的程度。樣品的吸收特性與其分子結(jié)構(gòu)有關(guān),因此,紫外光譜可以用于分析樣品的化學(xué)結(jié)構(gòu)以及其在制備和質(zhì)控過(guò)程中的純度和質(zhì)量。
紫外分光光度計(jì)主要由光源、單色器、待測(cè)樣品室、檢測(cè)器和計(jì)算機(jī)等五部分組成。
1、光源:它的光源通常采用一束高壓汞燈或者氘燈。
2、單色器:?jiǎn)紊鞯淖饔檬沁x擇所需的波長(zhǎng)范圍,以便用于測(cè)量。單色器通常由狹縫、光柵、反射鏡等部件組成,用于將白光分解成不同波長(zhǎng)的光,并按需選擇出目標(biāo)波長(zhǎng)。
3、待測(cè)樣品室:待測(cè)樣品室是用于測(cè)量樣品吸收率的部分。它是一個(gè)光學(xué)容器,內(nèi)部涂有黑色材料,以減小反射和散射。樣品通常放置在石英或者玻璃制成的管中,通過(guò)進(jìn)入室內(nèi)的光線照射,在檢測(cè)器中收集出經(jīng)樣品所吸收的光線進(jìn)行測(cè)量。
4、檢測(cè)器:檢測(cè)器通常采用光電倍增管(PMT)或者光敏二極管(PSD)等器件來(lái)測(cè)量樣品的信號(hào)強(qiáng)度。
5、計(jì)算機(jī):計(jì)算機(jī)用于輸入、處理和輸出數(shù)據(jù)。通常,計(jì)算機(jī)可以控制單色器、樣品室等部分的功能,并將檢測(cè)器中獲得的數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換成數(shù)字形式進(jìn)行分析和處理。
紫外分光光度計(jì)廣泛應(yīng)用于化學(xué)、生物化學(xué)、藥學(xué)、食品、環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域,通常用于以下應(yīng)用:
1、物質(zhì)定性和定量分析。
可以用于鑒定樣品中不同化學(xué)元素和官能團(tuán)。例如,當(dāng)不同樣品所吸收的波長(zhǎng)和吸收率差異存在時(shí),可以通過(guò)比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)譜圖來(lái)確定物質(zhì)的種類。對(duì)于已知物質(zhì),可以通過(guò)測(cè)量吸收率來(lái)計(jì)算其濃度。
2、合成過(guò)程監(jiān)控。
可以用于監(jiān)測(cè)化合物的合成過(guò)程。通過(guò)不斷檢測(cè)反應(yīng)的UV吸光度,可以了解化合物的濃度變化情況。
3、純度檢測(cè)。
可以用來(lái)檢測(cè)樣品的純度。通過(guò)比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)譜圖,可以確定樣品中其他雜質(zhì)的含量,并確保所測(cè)量的樣品不受到其他雜質(zhì)的干擾。
4、生物分子分析。
可以用于檢測(cè)蛋白質(zhì)、核酸和多糖等生物分子。通常是通過(guò)測(cè)量吸收光譜中的A280來(lái)確定生物分子的濃度,從而用于研究其結(jié)構(gòu)和功能。
紫外分光光度計(jì)*的分析原理和檢測(cè)技術(shù),可以為科研和工業(yè)應(yīng)用提供出色的分析手段,為人類的健康與發(fā)展做出積極的貢獻(xiàn)。